Імуноелектрофорез

The Імуноелектрофорез застосовується для лабораторного діагностичного виявлення моноклональних антитіл у крові пацієнта. Моноклональні антитіла отримують з однієї і тієї ж клітини і спрямовані проти тих же антигенів. З цієї причини їх слід оцінювати як патологічні та, якщо доведено, говорити про такі захворювання, як хвороба Вальденстрома.

Що таке Імуноелектрофорез?

Іони мають різну рухливість. Ця різна рухливість є основою процедури електроферезу. Ці методи відокремлюють різні речовини одна від одної за допомогою електричних полів і сили тяжіння. Добре відомим методом у цій галузі є імуноелектроферез.

Це якісний метод діагностики, який використовується для виявлення моноклональних антитіл. Антитіла - імунологічно активні білкові речовини із певної клітинної лінії. Моноклональні антитіла засновані на одних і тих же В-лімфоцитах і тому спрямовані проти одного епітопу. Кожна природна імунна відповідь на вторгнення антигенів відповідає поліклональній відповіді і тому спрямована проти різних епітопів. Отже, моноклональна імунна відповідь дає ознаки патологічних процесів в організмі.

Моноклональні антитіла зв'язують різні молекули з високою специфічністю. Це зв'язування може бути продемонстровано за допомогою імуноелектрофорезу. Процедура є якісною процедурою в лабораторній діагностиці та складається з двох типів процедури, електрофорезу в сироватці крові та імунодифузії.

Функція, ефект та цілі

Імуноелектрофорез поєднує методологію електрофорезу сироватки з імунодифузією. Сироватку пацієнта поміщають на агарозну гель або плівку ацетату целюлози. Також застосовується контрольна сироватка. За заявкою супроводжується електрофоретичне розділення зразків. Антисеру, IgG, IgA, IgM, оцтову кислоту для нормального електрофорезу та каппу та лямбда застосовують між розділовими лініями.

Це створює реакцію з антитілами в сироватці пацієнта, що створює лінії осадження. Залежно від використовуваного антисеруму, положення та форми окремих ліній можна зробити висновки про імуноглобуліни, що містяться у легких ланцюгах каппа або лямбда. У разі лямбда-смуги є вільні легкі ланцюги, складені з антитіл. Лабораторія надає додаткові дані за допомогою рідкісних IgE та IgD, що дозволяє точно визначити імуноглобуліни. Метод імунодифузійного електрофорезу має місце за П'єром Грабаром та Кертісом Вільямсом і відповідає комбінації електрофорезу агарозного гелю та дифузії антитіл.

Спочатку відбувається електрофорез агарозного гелю. Згодом містяться антитіла дифундують проти смуг антигенів і тим самим створюють дуги осаду. Це слід відрізняти від ракетного імуноелектрофорезу за Лореллом, який відповідає електрофорезу білків в агарозному гелі, кожен з яких має антитіла в певній концентрації. У гелі є дещо основний буфер, який лише дозволяє антигенам мігрувати і який змушує більшість антитіл до ізоелектричної точки через вплив незначно основного значення рН, поки вони не перестають рухатися електрофоретично.

На початку ракетного імуноелектрофорезу спостерігається надлишок антигену, завдяки чому утворюються розчинні комплекси антиген-антитіло. Під час електрофорезу відбувається також зв'язування між антигенами та іншими антитілами. Таким чином в точці еквівалентності утворюються імунопреципітати, які нагадують ракетно-подібні фігури з висотою, пропорційною концентрації антигену. Для оцінки випробування вимірюють висоту осаду.

Ви можете знайти свої ліки тут

Ризики, побічні ефекти та небезпеки

Виявлення моноклональних антитіл має особливе значення для діагностики множинної мієломи та хвороби Вальденстрема. Наведені дані свідчать про злоякісне переродження імунних клітин. Множинна мієлома відповідає раку в кістковому мозку, який характеризується злоякісним розмноженням клітин, що продукують антитіла в плазмі.

Ці плазматичні клітини продукують антитіла та їх фрагменти. Злоякісні клітини плазми завжди походять із загальної клітини-попередника і тому генетично ідентичні. Вони продукують лише моноклональні антитіла. Злоякісність даного захворювання може відповідати передраковій стадії, але вона може досягати і високо злоякісної стадії, яка без лікування швидко смертельною. Симптоми захворювання є наслідком злоякісного росту клітин або від антитіл та фрагментів антитіл. Найбільш поширені симптоми включають біль у кістках, розшарування кісток та спонтанні переломи.

Рівень кальцію в крові часто підвищується. Крім того, аномальні антитіла часто відкладаються в тканини і викликають функціональні порушення в органах, що може призвести до таких симптомів, як ниркова недостатність або порушення кровотоку. Хвороба Вальдстрема також є злоякісним захворюванням пухлини. Точніше, це злоякісне захворювання лімфоми, що зараховується до числа повільно прогресуючих і майже безсимптомних В-клітинних неходжкінських лімфом. У більшості випадків при захворюванні можна виявити аномальне вироблення моноклональних IgM внаслідок активності злоякісних клітин лімфоми.

Хвороба Вальденстрема за своїми властивостями надзвичайно схожа на множинну мієлому, але зазвичай виявляє більш сприятливий перебіг. Більшість пацієнтів із хворобою Вальденстрема значною мірою протікають безсимптомно до моменту їх діагнозу. Інші пацієнти проявляють симптоми на ранній стадії, такі як неспецифічна втома або периферичні невропатії, які викликані осадженням моноклонального IgM у мієліновій оболонці. Навіть невелика кількість IgM може спровокувати полінейропатію. Полінейропатія не спостерігається у інших пацієнтів, навіть при високому рівні. Крім того, можуть виникати неспецифічні симптоми, такі як лихоманка, небажана втрата ваги або нічна пітливість. Біль у кістках також характерна.

Через надвиробництво IgM кров стає гіпервіскозною, так що згадані симптоми можуть бути пов'язані з симптомами синдрому гіпервіскозності. У більшості випадків ця схильність до кровотеч проявляється частими кровотечами з носа, головними болями, загальним нездужанням або помутнінням зору та акустичними скаргами. З метою виявлення злоякісних захворювань цього типу імуноелектроферез давно став стандартною діагностичною процедурою.