З Тест FISH є мікроскопічним тестом на хромосому при пренатальній та карциномі діагностиці раку молочної залози, раку шлунка та хронічного лімфоцитарного лейкемії. Тест, результат якого доступний протягом 1-2 днів, в першу чергу може виявити хромосомні відхилення, які можна простежити до зміненого набору хромосом у певних хромосомах. Тест проводиться виключно як супровідний або попередній тест для детального аналізу хромосом, результати якого доступні лише через 2 - 3 тижні після видалення клітин.
Що таке тест FISH?
Тест FISH (Флуоресценція in situ гібридизація) в пренатальній діагностиці дозволяє робити висновки про змінений набір хромосом для певних хромосом. Для проведення випробування на FISH потрібно щонайменше 50 некультивованих клітин плода (амніонні клітини), які беруть із навколоплідних вод (приблизно 2 - 3 мл). Альтернативним методом отримання відповідних клітин є відбір ворсин хоріона, при якому клітини відбирають з області прикріплення пуповини шляхом біопсії.
Спеціальна процедура дозволяє диференціювати окремі нитки хромосом 13, 18, 21 і хромосоми X і Y за допомогою флуоресцентних кольорів, так що можлива трисомія помітна через наявність трьох замість двох гомологічних ланцюгів хромосоми . При раку шлунка та молочної залози тест FISH може бути використаний для перевірки наявності в пухлини більше двох копій гена HER2 / neu (рецептор людського епідермального фактора росту), що має наслідки для типу хіміотерапії. У випадках хронічного лімфоцитарного лейкемії найчастіші зрушення хромосом у певних генах можна визначити за допомогою декількох тестових аналізів FISH у зразках з кісткового мозку та периферичної крові, що також впливає на терапію.
Функція, ефект та цілі
Хромосоми в ізольованих клітинних ядрах робляться для розщеплення їх подвійної спіральної структури за допомогою спеціальної хімічної обробки або під дією тепла, а специфічні для хромосоми ДНК-зонди з відповідною комплементарною послідовністю ДНК з'єднуються з "їх" специфічними хромосомами. ДНК-зонди позначені різними кольоровими флуоресцентними кольорами, щоб помічені хромосоми можна було відрізнити одна від одної за допомогою спеціального програмного забезпечення та підрахувати в автоматизованому процесі.
Відомі z. В. Трисомії, в яких замість двох ланцюгів хромосоми для однієї хромосоми є три. Також відомі так звані моносомії, в яких присутня лише одна ланцюг хромосоми X і три-чотири гомологічні ланцюги всіх хромосом. Найважливішими хромосомними змінами, які можна виявити за допомогою тесту FISH у пренатальній діагностиці, є синдром Улріха Тернера (моносомія X), синдром потрійного Х (трисомія або полісомія X), синдром Клайнфелтера, при якому у всіх або частина соматичних клітин у хлопчиків має додаткову Х-хромосому (XXY замість XY), синдром Дауна (трисомія 21), синдром Едвардса (трисомія 18) та синдром Патау (трисомія 13).
Моносомія X, при якій у дівчаток є лише одна Х-хромосома, зазвичай є смертельним, а це означає, що приблизно в 98% випадків це призводить до викидня протягом перших трьох місяців вагітності. У випадку, якщо народження все-таки відбувається, дівчатка мають нормальну тривалість життя, мають середній інтелект, але часто страждають від ряду вад розвитку внутрішніх органів і переважно стерильні. Синдром потрійного Х з набором хромосом XXX) вражає лише дівчат. Можлива нормальна вагітність і пологи.
Здебільшого високі жінки з потрійною Х-хромосомою можуть нормально жити і зазвичай не виявляють фізичних відхилень, хоча труднощі з навчанням не є рідкістю і виникають проблеми з дрібною моторикою. Синдром Клайнфельтера, який може вражати лише хлопчиків і чоловіків, характеризується додатковою X-хромосомою, яка присутня у всіх клітинах організму або лише частково. Фізичні характеристики вище середнього зросту з незвично довгими руками і ногами. Синдром Клайнфельтера зазвичай призводить до зниження росту яєчок із зменшенням вивільнення тестостерону.
Синдром Дауна, синонім трисомії 21, здебільшого пов'язаний з певними фізичними характеристиками та когнітивними обмеженнями. Існують різні форми трисомії 21, серед яких переважає так звана вільна трисомія 21, приблизно в 95% випадків. Трисомія 18 (синдром Едвардса) викликає викидень у більшості випадків, пов’язана з різноманітними фізичними характеристиками, а тривалість життя становить лише кілька днів. Трисомія 13 (синдром Петау) також характеризується великою кількістю фізичних особливостей і небажаних подій, які часто призводять до викидня або мертвонародження. Тривалість життя дітей на термін становить лише кілька років.
Метою пренатального тесту FISH є виявлення відомих хромосомних порушень на ранній стадії, щоб запропонувати батькам альтернативу легального аборту, щоб перенести дитину до терміну. При раку молочної залози та печінки карциноми можна перевірити на наявність підвищеної кількості гена HER2 / neu за допомогою тесту FISH. У позитивному випадку спостерігається посилене формування рецепторів фактора росту, які реагують на певні хіміотерапії. Тести FISH також доступні для виявлення специфічних генетичних порушень при хронічному лімфоцитарному лейкемії (CLL), які покращують склад ефективних хіміотерапевтичних засобів.
Ризики, побічні ефекти та небезпеки
Сам тест FISH не пов'язаний з жодними ризиками та небезпеками. Тільки вилучення клітин, що підлягають дослідженню шляхом біопсії, або взяття проб навколоплідних вод (амніоцентез), пов'язане з незначним ризиком зараження через їх інвазивного характеру. Особливістю є те, що тест FISH може виявити деякі специфічні хромосомні дефекти, але невідомо, що немає хромосомних аберацій у разі негативного результату, оскільки не всі аномалії можуть бути виявлені тестом FISH. У разі позитивного результату тестування слід застосовувати подальші діагностичні процедури, щоб підтвердити результат або відхилити його як помилковий.
